Principios de espectrofotometría
El principio de la espectrofotometría es el siguiente:
La espectrofotometría consiste en medir cualitativa y cuantitativamente la sustancia que se va a medir midiendo la absorbancia de la luz en una longitud de onda específica o dentro de un rango de longitud de onda determinado. métodos de análisis. Tiene las ventajas de alta sensibilidad, fácil operación y rapidez, y es el método experimental más utilizado en experimentos bioquímicos.
Muchas sustancias se miden mediante espectrofotometría. En un espectrofotómetro, cuando se irradia continuamente luz de diferentes longitudes de onda sobre una solución de muestra de una determinada concentración, se puede obtener la intensidad de absorción correspondiente a diferentes longitudes de onda.
En un espectrofotómetro, cuando se irradia continuamente luz de diferentes longitudes de onda a una solución de muestra de una determinada concentración, se puede obtener la intensidad de absorción correspondiente a diferentes longitudes de onda. Si se utiliza la longitud de onda (λ) como abscisa y la intensidad de absorción (A) como ordenada, se puede dibujar la curva del espectro de absorción de la sustancia.
El principio de absorción selectiva de la espectrofotometría:
La interacción entre la materia y la luz tiene las características de absorción selectiva. El color de una sustancia coloreada se produce por la interacción entre la sustancia y la luz. Es decir, el color de una solución coloreada se debe a la absorción selectiva de luz por parte de las sustancias de la solución.
Debido a que diferentes sustancias tienen diferentes estructuras moleculares y diferentes capacidades de absorción para luz de diferentes longitudes de onda, los grupos estructurales con estructuras características tienen una longitud de onda real máxima que selecciona las características de absorción, formando un pico de absorción máximo y produciendo una absorción única. espectro. Incluso la misma sustancia absorbe luz en diferentes grados debido a su diferente contenido.
El método de utilizar el espectro de absorción único de una sustancia para identificar la presencia de una sustancia (análisis cualitativo), o utilizar el grado de absorción de una sustancia a la luz de una determinada longitud de onda para determinar el contenido de una sustancia (análisis cuantitativo), se llama espectrofotometría.