¿Cuáles son las diferencias entre las condiciones de cromatografía líquida de alto rendimiento y cromatografía líquida de ultra alto rendimiento?
Los principios son los mismos.
La diferencia es que uno es el instrumento y el otro es la columna cromatográfica.
Esta última cromatografía líquida de rendimiento ultraalto puede acortar el tiempo de detección, ahorrar tiempo y fase móvil y mejorar enormemente la eficiencia.
Hablemos primero de la columna de cromatografía. El tamaño de partícula de la columna de cromatografía líquida de ultra alto rendimiento será más pequeño y la columna será más corta. Si la sensación de una muestra que fluye a través de una columna de cromatografía líquida es como fluir a través de un tubo lleno de piedras, entonces una columna de cromatografía líquida de rendimiento ultraalto es como un tubo lleno de arena. Generalmente, el tamaño de partícula de las columnas de cromatografía líquida es de 5 um y el tamaño de partícula de las columnas de cromatografía líquida de rendimiento ultraalto es de 3,5 um, 3,0 um o incluso 1,7 um. De esta forma, la adsorción de la muestra y la fase estacionaria será más completa y la separación será más rápida.
En cuanto al instrumento, la tubería llena de arena mencionada anteriormente aumentará considerablemente la presión de la columna porque se reduce el tamaño de partícula de la columna cromatográfica. De esta manera, los cromatógrafos líquidos ordinarios no pueden soportar una presión tan alta. Por lo tanto, el cromatógrafo líquido de ultra alto rendimiento, desde la bomba hasta cada tubería, es resistente a la alta presión. Esto puede aprovechar al máximo el papel de la columna cromatográfica y separar rápidamente las muestras.
La imagen de arriba es un cromatograma líquido de alta resolución, una muestra analizada en 15 minutos. La siguiente imagen es un cromatograma líquido de ultra alto rendimiento. La misma muestra se analizó en 7 minutos. Y la forma del pico es mejor.