¿Cuáles son los requisitos para la concentración de proteínas de las muestras para electroforesis bidimensional? ¡Lo mejor es especificar!

Depende de todos sus requisitos de instrumentación y tiras IEF, ¿verdad? Utilizo GE Healthcare de esta empresa. Sus requisitos de concentración de proteínas están escritos en el manual del usuario.

/aptrix/UPP 01077 . NSF/Content/2d _ electrophoresis ~ 2d electrophoresis _ handbook

En general, no importa si la concentración es mayor, ya que el buffer será añadido al cargar la muestra. La carga de la muestra se basa en la cantidad total de proteína, por lo que cuando la concentración es demasiado baja, el instrumento limita el volumen total de la muestra y no agrega suficiente proteína. Finalmente, se quitó el pegamento y se tiñeron las manchas de proteínas que eran demasiado claras para verlas con claridad y no se pudieron secuenciar.

Hay muchos pasos 2D y es necesario optimizarlos. Si el póster no cuenta con suficiente soporte técnico por parte del fabricante o no tiene una persona superior que lo lleve consigo, entonces vale la pena explorarlo por su cuenta.