¿Debo ponerme en cuarentena al regresar a Xiayi desde Shanghai?
Datos ampliados:
Método de detección de ácido nucleico
Principio de detección
Todos los seres vivos contienen ácidos nucleicos, incluido el ácido desoxirribonucleico (ADN) y ácido ribonucleico (ARN). El nuevo coronavirus es un virus que sólo contiene ARN. La secuencia específica de ARN del virus es un signo que lo distingue de otros patógenos. Después de la aparición del nuevo coronavirus, los científicos chinos completaron el análisis de toda la secuencia del genoma del nuevo coronavirus en un período de tiempo muy corto. Al compararlo con las secuencias del genoma de otras especies, encontraron la secuencia de ácido nucleico específica en el. nuevo coronavirus. Si se puede detectar una secuencia de ácido nucleico específica del nuevo coronavirus en la muestra del paciente durante las pruebas de laboratorio clínico, se debe advertir que el paciente puede estar infectado por el nuevo coronavirus.
2 Detección del nuevo coronavirus
Principio de detección de ácido nucleico del nuevo coronavirus
El método más utilizado para detectar secuencias específicas del nuevo coronavirus es la PCR cuantitativa por fluorescencia (polimerasa reacción en cadena). Debido a que la plantilla para la reacción de PCR es solo ADN, el ácido nucleico (ARN) del nuevo coronavirus debe transcribirse de manera inversa a ADN antes de realizar la reacción de PCR. En el sistema de reacción de PCR, hay un par de cebadores específicos y una sonda Taqman. La sonda Taqman es una secuencia de oligonucleótidos específica. Los dos extremos de la sonda están marcados con un grupo fluorescente indicador y un grupo fluorescente de extinción, respectivamente. Cuando la sonda está completa, la señal fluorescente emitida por el grupo indicador es absorbida por el grupo de extinción. Si hay una secuencia objetivo en el sistema de reacción, la sonda se unirá a la plantilla durante la reacción de PCR y la ADN polimerasa utilizará la misma; actividad exonucleasa de la enzima A medida que la sonda se digiere a lo largo de la plantilla, el grupo indicador se separa del grupo desactivador y emite fluorescencia. Cada vez que se amplifica una cadena de ADN, se produce una molécula fluorescente. El instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia puede controlar que el número de ciclos (valor Ct) en el que la fluorescencia alcanza un umbral preestablecido esté relacionado con la concentración de ácido nucleico viral. Cuanto mayor es la concentración de ácido nucleico viral, menor es el valor de Ct. Los productos de diferentes fabricantes determinarán el valor de juicio positivo de este producto en función del rendimiento de sus productos.
Método de detección de ácido nucleico en nuevo coronavirus
Para la detección de ácido nucleico del nuevo coronavirus, recolecte muestras de acuerdo con la sección "Requisitos de muestra" de las instrucciones del kit. Los tipos de muestras de rutina incluyen hisopos de garganta, hisopos nasales, esputo, líquido de lavado bronquial, líquido de lavado alveolar, etc.
Después de obtener una muestra del paciente, es necesario analizarla lo antes posible. Si las muestras que deben transportarse no pueden analizarse de inmediato, deben empaquetarse a baja temperatura de acuerdo con los requisitos de las instrucciones y enviarse a una agencia de pruebas especializada para su análisis. Después de recibir la muestra, la institución de pruebas extraerá el ácido nucleico de la muestra y el reactivo de extracción de ácido nucleico deberá utilizar el kit de extracción de ácido nucleico especificado en las instrucciones aprobadas del producto.
Primero es necesario transcribir de forma inversa el ARN viral a ADNc y luego amplificarlo y detectarlo. La amplificación y detección por PCR debe utilizar un instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia especificado en las instrucciones aprobadas del producto. El valor Ct de la muestra obtenida mediante PCR cuantitativa de fluorescencia puede determinar si la muestra del paciente contiene el nuevo coronavirus.
En el proceso anterior, la recolección, almacenamiento y transporte de muestras, la extracción y detección de ácidos nucleicos de muestra y la interpretación de resultados deben realizarse en estricto cumplimiento de los requisitos de las instrucciones del kit.