Los hijos de Juana
Eleanor (1498-1558), se casó con Manuel I de Portugal en 1518 y tuvo un hijo y una hija; se casó con el rey Francisco I de Francia en 1530 y no tuvo hijos.
Carlos V (1500-1558), Emperador del Sacro Imperio Romano Germánico, Rey de Roma, Rey de España y Rey de Italia. En 1526, él y su tía y prima, la princesa Isabel de Portugal (hermana de Manuel I y Juana de Portugal, hija mayor de María de Aragón), tuvieron cuatro hijos y dos hijas.
Isabella (1501-1526), se casó con el rey Cristián II de Dinamarca en 1515 y tuvo dos hijas.
El emperador del Sacro Imperio Romano Germánico Fernando I (1503-1564) se casó con la princesa Ana de Bohemia y Hungría en 1521 y tuvieron cuatro hijos y once hijas.
María (1505-1558) se casó con el rey Luis II de Hungría en 1522 y no tuvo hijos.
Catalina (1507-1578) se casó con el rey Joao III de Portugal en 1525 y tuvo seis hijos y tres hijas.